Pr Nogueira

[Michael_Scott]

Bonsoir, 

Je ne comprend pas pourquoi au QCM 5, les items ABDE sont vrai et la C fausse. Quelqu'un pourrait m'expliquer ? 

Merci. 

 

 

 

[Metallica]

Bonsoir @Michael_Scott

 

Item A : On sait qu'au niveau des cellules C cancéreuses du tissu pancréatique ,il y a un clivage protéolytique de la forme de 575kDa en deux fragments de 400kDa et 175kDa respectivement sécrété et membranaire. On sait également via l'immunotransfert que l'As reconnait le fragment de 175kDa des cellules C donc une fois qu'on a repéré ça, on peut en deduire qu'en prenant un extrait protéique total, on pourra mettre ce fragment en évidence puisque les cellules C font partie de cet extrait protéique total ;)).

 

Item B: l'Ac1 reconnait un épitope sequentiel sur la forme de 400kDa (bande à 400kDa en immunotransfert +Dot-blot) et l'Ac2 reconnait une épitope conformationnel sur la même forme de 400kDa (signal de l'Ac2 en dot blot sur le secretome absent de l'immuntransfert)  du coup on a tout ce qui nous faut pour faire notre ELISA sandwich avec cette forme.

 

Item C : Dans le cas présent,ce qui permet de distinguer les cellules saines des cancéreuses, ce sont les formes membranaires de TAT de 575kDa et de 175kDa respectivement présentes chez les cellules saines et les cellules cancereuses. Cependant l'As n'est pas discriminant et reconnait les deux formes (cf colonne As en immunotransfert)  donc il ne sera pas en mesure de faire la distinction entre les deux populations cellulaires. Même s'il n'avait reconnu que la forme de 575kDa, ça n'aurait pas été bon puisqu'elle est présente au sein des deux types cellulaires.(Il aurait fallu un Ac ne reconnaissant que la forme de 175kDa, ce qui toutefois aurait été difficile à mettre en place dans la mesure ou les épitopes de cette forme sont aussi présents sur la forme originelle de 575kDa). 

 

Item D : Le problème que j'ai évoqué dans l'item C à savoir la présence de la forme 575kDa sur les deux populations cellulaires, est maintenant résolu puisqu'il n'y a maintenant que les cellules cancéreuses qui circulent dans le sang. En conséquence ,en utilisant l'Ac specifique de cette forme, on pourra effectivement faire de la cytométrie en flux en marquant cet Ac1

 

Item E : Même principe que pour l'item B, on utilisera les mêmes étapes que l'ELISA sandwich pour faire notre ELISpot du coup ça fonctionnera avec ces 2 Ac.

 

Voilou

 

 

 

[Michael_Scott]

Franchement, merci beaucoup. Ça m'aide grave. 

[Metallica]

Avec plaisir ;))