ED recherche levade

[_zaly__]

Salut!! 

Je ne comprend absolument rien du tout lorsqu'il faut intégrer un insert dans un vecteur comment savoir qu'elles endonucléases il faut utiliser ??

même comment créer l'insert ?? le plasmide ?? 

Pourquoi on garde que ce qui est en rouge ou bleu ?? 

 

Si quelqu'un peut m'expliquer sa méthode merci d'avance

[LaRateATouille]

il y a 30 minutes, _zaly__ a dit :

Salut!! 

Je ne comprend absolument rien du tout lorsqu'il faut intégrer un insert dans un vecteur comment savoir qu'elles endonucléases il faut utiliser ??

même comment créer l'insert ?? le plasmide ?? 

Pourquoi on garde que ce qui est en rouge ou bleu ?? 

 

Si quelqu'un peut m'expliquer sa méthode merci d'avance

Salut,

Lorsque tu souhaites insérer un vecteur dans un plasmide tu dois utiliser des enzymes de restrictions pour couper ton vecteur et ton plasmide. Les enzymes de restrictions avec les séquences quelles reconnaissent te seront toujours données. (ici Xhol, ClaI et SalI)

Ce que tu recherches c'est insérer ton vecteur dans le plasmide. Pour cela, il faut que tes extrémités de ton plasmide et de ton vecteur soient complémentaire (règle de complémentarité des bases) sinon le couplage serra impossible. Tu dois donc regarder les extrémités de ton insert et de ton plasmide pour savoir si ça colle ou pas. /!\ Attention à l'orientation des brins !! 

Je t'invite à te balader sur le forum, il y a des tas de questions sur ces enzymes de restrictions avec les inserts et les plasmides, tu trouveras surement ce que tu recherches avec des RM bien plus compétents que moi. (mots clés: sens insertion enzyme)

En espérant t'avoir aider un minimum. 

Bonne soirée. 

Edited March 17, 2020 by LaRateATouille

[Théophylline]

Salut @_zaly__ ! 

Je te conseille de lire ce sujet  : 

 

 

[_zaly__]

Merci beaucoup!