Peroxydase anti peroxydase

[V16]

Est ce que qqn pourrait m’éclairer sur cette technique ? Mercii 

[Metallica]

Re @V16

 

C'est une alternative aux techniques qui nécessitent un couplage covalent entre la molécule émettant le signal et le fragment Fc d'un Ac , ici ce sont les chaines légères des Ac qui vont se lier à la molécule émettant le signal par des liaisons faibles ....c'est ça que tu voulais savoir ou il y a autre chose ?

[carolineb]

salut @Metallica! pour ce système, l'enzyme est couplée aux Ac mais le fait qu'elle soit liée via les chaines légères change quoi?

[Metallica]

Ça évite de devoir faire toutes les manips faisant en sorte de créer des liaisons covalentes entre l'enzyme et l'Ac ( la liaison chaine legere enzyme n est pas covalente )

Edited February 22, 2020 by Metallica

[Liliputienne]

il y a 59 minutes, carolineb a dit :

l'enzyme est couplée aux Ac mais le fait qu'elle soit liée via les chaines légères change quoi?

 

il y a 44 minutes, Metallica a dit :

Ça évite de devoir faire toutes les manips faisant en sorte de créer des liaisons covalentes entre l'enzyme et l'Ac ( la liaison chaine legere enzyme n est pas covalente )

Et ça permet (surtout) de ne pas modifier le fragment du site anticorps, contrairement à l'utilisation des enzymes qui de part leur encombrement stérique et leur liaison covalence peuvent modifier cette partie et du coup induire un résultat faussement négatif 

[carolineb]

merci bcp @Metallica @Liliputienne!

 

il y a 23 minutes, Liliputienne a dit :

Et ça permet (surtout) de ne pas modifier le fragment du site anticorps, contrairement à l'utilisation des enzymes qui de part leur encombrement stérique et leur liaison covalence peuvent modifier cette partie et du coup induire un résultat faussement négatif

 

du coup quand un Ac est lié à une enzyme par liaison covalente, elle modifie la partie de l'Ac liée alors que par liaison non covalente ça ne modifie rien c'est ça?

[Metallica]

Il y a 1 heure, carolineb a dit :

u coup quand un Ac est lié à une enzyme par liaison covalente, elle modifie la partie de l'Ac liée alors que par liaison non covalente ça ne modifie rien c'est ça?

 

Yes c'est ça après une liaison covalente n'altère pas nécessairement les paratopes ou les sites charnières entre les différents fragments. Ça ne doit d'ailleurs majoritairement pas etre le cas vu que l'on retrouve très souvent ce système de couplage covalent entre l'enzyme et le fragment Fc ...mais bon ça reste possible et dans ce cas , ce système alternatif utilisant le système peroxydase/antiperoxydase présentera des avantages certains de ce coté là par rapport au couplage covalent ( c'est ça le véritable intérêt comme l'a très justement souligné @Liliputienne) .

Après comme toute technique , il y a des contraintes et ici ça sera l'établissement de cette architecture moléculaire (Faire par exemple en sorte que l'Ac2 reconnaisse un épitope présent sur les 2 fragments Fc des deux Ac ayant des spécificités différentes ... cé pa izi)

Edited February 23, 2020 by Metallica