Ancien du Bureau Please Posted January 30, 2020 Ancien du Bureau Posted January 30, 2020 Bonsoir ! Aujourd'hui en cours je n'ai pas très bien compris le fonctionnement de l'interaction renilla luciférase et GFP, quelqu'un saurait me le reexpliquer svp ? ^^ Quote
Solution dodoo Posted January 30, 2020 Solution Posted January 30, 2020 Salut! La technique est basée sur le transfert d'énergie par résonance (BRET). Tu as donc un donneur d'énergie (la Renilla Luciférase) qui va se lier à un substrat (elle va émettre à 480nm). L'énergie d'émission est transmise à GFP qui à son tour émet une lumière de longueur d'onde = 509nm. Et ce transfert d'énergie n'est possible que si le donneur et le receveur sont proches (< 100 Angstroms) Quote
Ancien du Bureau Please Posted January 30, 2020 Author Ancien du Bureau Posted January 30, 2020 il y a 1 minute, dodoo a dit : Salut! La technique est basée sur le transfert d'énergie par résonance (BRET). Tu as donc un donneur d'énergie (la Renilla Luciférase) qui va se lier à un substrat (elle va émettre à 480nm). L'énergie d'émission est transmise à GFP qui à son tour émet une lumière de longueur d'onde = 509nm. Et ce transfert d'énergie n'est possible que si le donneur et le receveur sont proches (< 100 Angstroms) Merci @dodoo Donc Renilla n'emet de la lumière que si un ligand se lie sur elle ? Et en fonction du ligand, la conformation change et Renilla emet plus ou moins d'energie (captée plus ou moins par la GFP ?) Quote
caroline Posted January 31, 2020 Posted January 31, 2020 Salut, oui il faut que la Renilla soit activée pour pouvoir émettre de la lumière et ce toujours avec la même longueur d’onde ! D’ailleurs la GFP (comme toutes les molecules luminescentes dont on vous parlera) a une longueur d’onde d’activation (480) et d’émission (509 = vert) bien précise. Mais dans tous les cas, dans les QCMs à propos du BRET, toutes les infos nécessaires sont dans l’énoncé du QCM, je te conseille d’en regarder quelques uns pour voir qu’est-ce qu’on attend de toi. Et les longueurs d’ondes d’activation et d’émission sont spécifiques d’une molécule, cela nous permet de savoir si c’est bien elle qui a réagit Quote
Ancien du Bureau Please Posted January 31, 2020 Author Ancien du Bureau Posted January 31, 2020 il y a 6 minutes, caroline a dit : Salut, oui il faut que la Renilla soit activée pour pouvoir émettre de la lumière et ce toujours avec la même longueur d’onde ! D’ailleurs la GFP (comme toutes les molecules luminescentes dont on vous parlera) a une longueur d’onde d’activation (480) et d’émission (509 = vert) bien précise. Mais dans tous les cas, dans les QCMs à propos du BRET, toutes les infos nécessaires sont dans l’énoncé du QCM, je te conseille d’en regarder quelques uns pour voir qu’est-ce qu’on attend de toi. Et les longueurs d’ondes d’activation et d’émission sont spécifiques d’une molécule, cela nous permet de savoir si c’est bien elle qui a réagit Parfait merci beaucoup !! Quote
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