lilcha Posted December 29, 2019 Posted December 29, 2019 salut , j ai pas compris bien compris ce qcm comment on peut conclure si on a iune mutation dans les sites du coupures du DNA ou bien du cDNA ? et les 3 bandes c etaient 2 fragments ADN et cADN ? merciii d avance QCM 2 : On hybride (en milieu liquide) du DNA génomique, dénaturé et marqué par un isotope radioactif, avec un cDNA (copie complémentaire simple brin du messager mature d'une protéine), puis on fait agir une nucléase de type S1 (connaissant les propriétés de cette enzyme et sachant qu'elle est utilisée dans des conditions où elle dégrade complètement tout ce qu'elle peut dégrader). Après extraction des fragments d'ADN et dénaturation, on sépare les fragments par électrophorèse, puis on les visualise par autoradiographie. On observe 3 bandes. On peut déduire de cette expérience que Quote
Ancien Responsable Matière Solution Moumou Posted December 29, 2019 Ancien Responsable Matière Solution Posted December 29, 2019 Salut @lilcha, La nucléase S1 coupe l'ARN ou l'ADN simple brin. Si on observe 3 fragments, cela signifie que 2 zones ont été coupée et ces deux zones sont forcément simple brin. Vu qu'on hybride un de l'ADN génomique simple brin avec son ADNc, on a une hybridation seulement sur les exons qui vont du coup être les seules zones double brin. Tu en conclue que seul les introns peuvent être clivés et comme tu as 2 coupures, tu en déduis qu'il y a 2 introns dans ton ADN génomique. Ensuite la A est fausse aussi parce que la nucléase S1 ne coupe pas les séquences palindromiques, vu que ça c'est plutôt une propriété des endonucléases. La C est également fausse car comme tu obtiens un cDNA à partir d'un ARNm, il ne contient pas d'introns. En plus s'il avait eu des introns, ils se seraient hybridés avec de DNA et on aurait eu aucun clivage pas la nucléées S1 et donc un seul fragment. La D, pas vraiment. C'est possible mais bon on pourra jamais savoir si c'est le cas avec cette technique et puis c'est pas à cause de ça que l'enzyme a coupé l'ADN. La E, on ne peut pas traduire de l'ADN vu que les tRNA reconnaissent les U et pas les T. Ça va mieux ? Quote
lilcha Posted December 29, 2019 Author Posted December 29, 2019 @Moumou vraiment merciiiii beaucoup !! Quote
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