Mutations

[Noel_Flantier]

Bonjour,

Pourrait on m'expliquer pourquoi l'item C est vrai, la sonde s'hybridant sur des séquences identiques chez les 2 patients, je n'arrive pas à voir ce qui entraine la différence de taille

QCM 17 à 19. L'analyse des cDNA (obtenu par transcription inverse de ce messager) normal et muté montre les séquences suivantes : normal              5'....CCG AAT TCA ATC ATC ATC ATC ATC ATC....3' muté                5'....CCG GAT TCA ATC ATC ATC ATC ATC ATC....3'
 QCM 17. Sachant que l'enzyme de restriction EcoRI reconnait la séquence G/AATTC 
 
C/ on sépare par la technique de Southern les fragments de ces cDNA (obtenus par coupure par EcoRI et par 2 autres enzymes de restriction qui coupent en dehors de la séquence indiquée cidessus) et on utilise la sonde marquée suivante : 3' AGT TAG TAG TAG TAG TAG TAG5' Le fragment obtenu à partir du cDNA muté (et révélé par la sonde marquée) est de plus grande taille que le fragment normal.

 

Un grand merci d'avance !

[LeKlitcheur]

La mutation a changé la séquence que reconnaissait l'enzyme de restriction EcoRI :

Séquence Normale : 5'....CCG  / AAT TCA ATC ATC ATC ATC ATC ATC....3' 

Séquence Mutée : 5'....CCG GAT TCA ATC ATC ATC ATC ATC ATC....3'

 

(Le / représente la ou l'enzyme de restriction va couper la séquence)

Du coup le fragment obtenu à partir du cDNA muté est plus grand puisque la sonde va se fixer sur une séquence qui n'a pas été coupée par l'enzyme de restriction !

J'espère t'avoir éclairé !

[Noel_Flantier]

@LeKlitcheur parfait merci beaucoup !!