PCR

[petitepharmacienne]

Salut! je n'arrive pas du tout à répondre à ces items quelqu'un pourrait m'expliquer?

 

La séquence de cette protéine n’est constituée que d’un seul exon :  ATGGTCGTGCACCGCTAGCGATCGATCGATGGCTGGAGTCAGCTAGCATACGACTAGGGCAGGCTGGATGA

 

C. Si l’on réalisé une PCR, les deux oligodésoxynucléotides choisis pour effectuer cette amplification doivent avoir les séquences suivantes : ATGGTCGTGC et GGCTGGATGA

D. Si l’on réalisé une PCR, les deux oligodésoxynucléotides choisis pour effectuer cette amplification doivent avoir les séquences suivantes : ATGGTCGTGC et TCATCCAGCC.

E. La séquence de l’ARNm codant pour la protéine mutée sera: UACCAGCACGUGGCGAUCGCUAGCUAGCUACCGACCUCAGUCGAUCGUAUGCUGAU CCCGUCCGACCUACU.

[Violette1]

Salut ! 
Peux-tu me dire si ces items sont vrais ou faux?

Et l’énoncé complet pour savoir quelle est la séquence de la protéine « mutée » de l’item E

 

Merci!

[petitepharmacienne]

QCM 20 – Lors d’un cours donné aux Rangueillois, le Professeur L s’interroge sur la maturité cérébrale dont ils font preuve, aucun d’entre eux ne réagissant à ses références à Spiff le spationaute ou encore pirates des Caraïbes. Il fait l’hypothèse que les Rangueillois sont atteints d’une maladie génétique touchant les cellules du cerveau. Après séquençage de leurs ADN, il s’est rendu compte de la mutation d’une protéine spécifique des neurones. La séquence de cette protéine n’est constituée que d’un seul exon :  ATGGTCGTGCACCGCTAGCGATCGATCGATGGCTGGAGTCAGCTAGCATACGACTAGGGC AGGCTGGATGA
 
Afin de trouver un moyen de soigner cette maladie, il veux produire cette protéine en grande quantité pour mieux pouvoir l’étudier. On sait par ailleurs que cette protéine n’a pas besoin de modification post-traductionnelle.  L’objectif est de transfecter un plasmide avec la séquence codante de la protéine mutée, il va donc falloir l’isoler et l’amplifier. Note : La rtPCR est une technique permettant d’obtenir un ADNc double brin à partir ARNm simple brin :

 

A. On peut isoler, puis amplifier par réaction en chaîne à la polymérase (PCR), un fragment correspondant intégralement à la protéine mutée à partir de l'ADN extrait de cellules nucléées issues du foie d’un Rangueillois. (VRAI)

 

B. On peut isoler un fragment correspondant intégralement à la protéine mutée par rtPCR à partir d’ARNm extrait de cellules nucléées issues du foie d’un Rangueillois. (FAUX)

 

C. Si l’on réalisé une PCR, les deux oligodésoxynucléotides choisis pour effectuer cette amplification doivent avoir les séquences suivantes : ATGGTCGTGC et GGCTGGATGA. (FAUX)

 

D. Si l’on réalisé une PCR, les deux oligodésoxynucléotides choisis pour effectuer cette amplification doivent avoir les séquences suivantes : ATGGTCGTGC et TCATCCAGCC. (VRAI)

 

E. La séquence de l’ARNm codant pour la protéine mutée sera UACCAGCACGUGGCGAUCGCUAGCUAGCUACCGACCUCAGUCGAUCGUAUGCUGAU CCCGUCCGACCUACU.
 (FAUX)

 

voila !! @Violette1

[Violette1]

Pour l’item C : on voit que les amorces qu’on nous propose sont les extrémités 5’ et 3’ de la séquence de la protéine. On ne pourrait pas faire une PCR grâce à ces 2 amorces, il faut une amorce en 5’ et une en 3’ de la séquence complémentaire à la séquence de la protéine (comme dans l’item D). Tu comprends ? 

Pour la E je ne comprends pas non plus pourquoi il est faux...

[petitepharmacienne]

d'accord merci pour la C! @Violette1

[Awwa]

Hello  @louiseanna05  je pense que c'est faux parce que la séquence de l'ARNm sera la même que l'ADN mais juste avec des U qui remplacent les T.

 

D'où la correction suivante : AUGGUCGUGCACCGCUAGCGAUCGAUCGAUGGCUGGAGUCAGCUAGCAUACGACUAGGGC AGGCUGGAUGA.

Edited November 3, 2019 by Awwa

[petitepharmacienne]

ouii c'est ça merci @Awwa