poluuuux Posted October 25, 2019 Posted October 25, 2019 Bonsoir! Je bloque sur le QCM en pièce jointe, item C. On sait que le séquençage d'Edman concerne les peptides, pour 60 AA maximum sans erreur, il me semble qu'en TD il a été dit qu'on pouvait avoir des protéines plus longues, mais 120 kDa ça parait un peu beaucoup? Car dans la correction détaillée du TAT, il est dit que la protéine ne possède que 12 AA, alors qu'un acide aminé a une masse moléculaire de 110 Da… Ce qui fait que l'intégrine a un peu plus de 1000 AA? C'est assez flou, je ne vois pas trop quelle est donc la limite pour le séquençage d'Edman. Bonne soirée! Quote
Nemditalie Posted October 26, 2019 Posted October 26, 2019 Bonjour, En effet, tu as raison 1 acide aminé = 110 Da et non 110 kDa, il n’y a donc pas seulement 12 AA dans cette protéine. Ensuite, le séquençage automatique d’Edman est possible pour des molécules de 20 à 60 AA. Il est donc nécessaire de cliver la protéine en peptides afin de pouvoir appliquer cette méthode. Ici, le B mercaptoéthanol permet de cliver les 2 chaines qui sont reliées entre elles par un pont disulfure. En espérant t’avoir un peu aidé... Bonne journée Quote
Solution Luciemas Posted October 26, 2019 Solution Posted October 26, 2019 Bonsoir ! Alors oui le séquencage d'Edman concerne bien les peptides composés au maximum de 60 aa. L'intégrine alphai est constituée de plusieurs chaines associées entre elles par des ponts dissulfures. Le poids total de l'intégrine alphai est de 80 kDa (chaine alpha) + 40 kDa (chaine béta) = 120kDa. Or on sait que 1 aa = 110 Da Ici, il y a donc 1090 aa (120 000/110). Afin de pouvoir réaliser le séquencage d'Edman il faut donc au préalable couper la protéines en petits peptides. Pour cela, on utilise différentes protéases : - Le bromure de cyanogène - La trypsine - La chymotrypsine J'espère que c''est plus clair... voila Bon courage Quote
poluuuux Posted October 26, 2019 Author Posted October 26, 2019 Il y a 2 heures, Luciemas a dit : Bonsoir ! Alors oui le séquencage d'Edman concerne bien les peptides composés au maximum de 60 aa. L'intégrine alphai est constituée de plusieurs chaines associées entre elles par des ponts dissulfures. Le poids total de l'intégrine alphai est de 80 kDa (chaine alpha) + 40 kDa (chaine béta) = 120kDa. Or on sait que 1 aa = 110 Da Ici, il y a donc 1090 aa (120 000/110). Afin de pouvoir réaliser le séquencage d'Edman il faut donc au préalable couper la protéines en petits peptides. Pour cela, on utilise différentes protéases : - Le bromure de cyanogène - La trypsine - La chymotrypsine J'espère que c''est plus clair... voila Bon courage Ça l'est! Merci beaucoup! Quote
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