plasmide/insert

[maestro]

cc,

http://www.noelshack.com/2019-11-2-1552418863-capture-d-ecran-2019-03-12-a-20-27-22.png

est ce que si je coupe un plasmide avec NCO1 et un insert avec PAE1 en amont et en aval de la séquence que je veux, l'insert va bien rentré ds le plasmide ou pas?

http://www.noelshack.com/2019-11-2-1552419449-capture-d-ecran-2019-03-12-a-20-37-20.png

et si je fais pareil mais plasmide avec PAE1 ou NLA3 et insert avec Sun1? vu que c'est la même séquence mais inversé peut être que y'a moyen? 

merci d'avance mm si je sais que c'est pas trop claire, en gros je veux juste savoir quand on fait avec les / pour savoir si ca colle ou pas, est ce que ca marche que si entre les / c'est strictement identique ou ca marche aussi si la séquence est inversé? ou si c'est la mm séquence mais les / sont opposés,

bref merci à celui qui comprendra  

[TritonX100]

Slt maestro pour ton premier exemple si on prend le plasmide digéré par NCO1 C/CATG/G et l'insert par PAE1 G/CATG/C, l'insert ne pourra pas rentré dans le plasmide car 5' C/          3'  ne peut pas s'insérer avec 5'         /C  3'

                                      3' GGTAC/ 5'                                             3' /GTACG 5'

 

Pour ton deuxième exemple si on coupe le plasmide avec NLAC /CATG/  et l'insert avec Sun1 C/GTAC/G  alors deja la sequence en rouge n'est pas la meme et on voit que 5'CATG/ 3' ne peut pas s'insérer avec 5' /GTACG 3'

                                                                                                         3'            /C 5'

 

Je sais pas si ma réponse est très claire, hesites pas 

 

[maestro]

merci @TritonX100 c'est super clair!