Southern blot

[Margot_Brd_]

Bonjour bonjour, je suis entrain de revoir la partie sur le Southern Blot et je ne comprends pas tellement le rôle du sperme de poisson dans la saturation du filtre. À quoi sert-il ? Que se passerait-il sans ? Merci  

[Cactus]

Salut @Margot_Brd_

 

L'ADN du sperme de poisson permet d'éviter les hybridations non spécifiques entre ton fragment et ta sonde radioactive 

Du coup sans le sperme de poisson, on peut trouver des hybridations non spécifiques et on ne détectera pas ta sonde 

Edited October 15, 2018 by Cactus

[Sternocleidomastoidien]

Slt!

Je complète le réponse de cactus. L'ADN de poisson est très peu similaire a l'homme donc les quelques séquences qui s'hybrident permettent d'éviter les appariement incomplets entre la sonde radioactive et le fragment  

[Magnum]

  On 10/15/2018 at 3:55 PM, Cactus said:

Du coup sans le sperme de poisson, on peut trouver des hybridations non spécifiques et on ne détectera pas ta sonde 

Expand  

Et au contraire !!! Ce qui se passe c’est que tu auras une hybridation non spécifique, ta sonde tu l’as détectera, mais ça sera totalement inutile puisqu’elle se sera apparié sur une séquence partielle, autrement dit, pas du tout spécifique de ce que tu recherches. L’interet c’est justement  de voir ta sonde mais uniquement sur la séquence qui t’interesse, donc tu satures les séquences non spécifiques pour éviter l’appariement partiel.

 

Sans le sperme de poisson tu détecteras ta sonde un peu partout et ça sera donc sans intérêt 

 

C’est un peu plus clair pour toi @Margot_Brd_?

[Margot_Brd_]

@Magnum Yes! Merci a vous trois  

[seeeeb]

  On 10/15/2018 at 3:47 PM, Margot_Brd_ said:

Bonjour bonjour, je suis entrain de revoir la partie sur le Southern Blot et je ne comprends pas tellement le rôle du sperme de poisson dans la saturation du filtre. À quoi sert-il ? Que se passerait-il sans ? Merci  

Expand  

Salut @Margot_Brd_ 

 

Alors oui comme l'ont dit tes camarades, l'ADN de poisson est très peu simillère (ou très différent) de l'ADN de l'Homme

De ce fait --> L'ADN du sperme de poisson permet d'éviter les hybridations non spécifiques entre le fragment et la sonde radioactive 

                  --> Ainsi, sans le sperme de poisson, on peut trouver des hybridations non spécifiques et on ne détectera pas ta sonde

 

 

Pour être plus clair, le sperme de poisson va te permettre en quelques sorte de "laver" les Brins d'ADN non hybridés de manière spécifique.

J'espère avoir été clair!! 

 

Bon courage

[Guest leo]

bonjour, ce que je ne comprends pas c'est pourquoi la sonde s'hybriderait mal ?