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Coucou :D

J'ai un petit problème concernant le QCM 1 item E (FAUX). Je ne comprends pas pourquoi le dot-blot ne pourrait pas marcher dans ce cas là ?

Merci beaucoup !

Bonne soirée

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Posted

Coucou,

Parce que ton épitode est séquenciel, et que le dot blot est non dénaturant du coup il ne sera pas détecté

  • Ancien du Bureau
Posted

Bonsoir, ce n'est pas cela @Dine ^^.
En fait tu ne peux pas purifier quelque chose avec le dot blot : cela permet de détecter (qualitatif, voir semi-quantitatif), pas de purifier.

Attention, on peut tout à fait détecter un épitope séquentiel en conditions non-dénaturantes !

Posted (edited)

Il me semble avoir lu ça quelque part en justification à ce QCM, et du coup est ce que tu pourrais m'expliquer dans quel cas, vu la fin de ton message :( @Zuji

Edited by Dine
  • Ancien du Bureau
  • Solution
Posted

Et bien tu peux détecter un épitope séquentiel quelque soit les conditions (ou presque), dénaturantes ou non : IP (non dénaturantes), dot-blot (non dénaturantes), IT (dénaturantes), etc.... La seule technique qui peut ne pas fonctionner c'est l'immunofluorescence sur des cellules vivantes car l'épitope ne sera peut être pas accessible (par exemple, si il est intracellulaire, et que la membrane plasmique n'est pas perméable.).

 

Il faut partir du principe :

1) Un épitope séquentiel, si il est accessible, est toujours détecté en conditions dénaturantes ou non.
2 ) Un épitope conformationnel, si il est accessible, n'est jamais détecté en contions dénaturantes, seulement en conditions dénaturantes.

Posted

Hello!!!

J'ai une autre question portant sur cet exercice, il s'agit du qcm 3 item D:

http://www.tutoweb.org/tat_librairie/Purpan/Annales de Concours/2016-2017/S2/CONCOURS RECHERCHE 2016-2017.pdf

 

En immuno transfert, le clone B2 n'apparaît pas, par conséquent on peut en déduire qu'il s'agit certainement d'un épitope conformationnel, hors, l'item est conpté faux, pourquoi? 

@Zuji

  • Ancien du Bureau
Posted

Attention ! Tu n'as rien en immunotransert, mais rien non plus en ELISA-indirect, qui est une méthode non dénaturante ! Donc B2 ne reconnait AUCUN épitope sur AK5 (1-350), ni conformationnel ni séquentiel ;) !

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