Problèmes de bords collants/francs

[Cath]

http://www.tutoweb.org/tat_librairie/Rangueil/Colles/S2/2016-2017/Colle n°7 20.03.17 (SP, Recherche).pdf

 

Bonjour j'ai une question par rapport au QCM 25E : On voit que PvuII crée des bords francs sur l'ADNc. Ma question c'est : comment, alors qu'il a des bords francs peut-il s'assembler avec un bord du vecteur ? C'est pas forcément sur ce QCM là (il me sert d'exemple) mais en général : est ce qu'à partir d'enzymes de restriction qui coupent des bords francs on peut insérer un ADNc dans un vecteur ? Parce qu'il a pas de séquence qui "dépasse"...

 

Merci !

[SBW]

Salut ! 

alors je n'ai que peu d'expérience en recherche donc tout ce que je vais dire est à confirmer 

je suis déjà tombé sur des items tels que du décrit, et ça ne semble pas poser de pb : en fait a particularité est qu'il ne faut pas faire attention à la compatibilité des bases, car comme tu l'as dit il n'y a pas d'appariement entre les deux brins à assembler  mais seulement à l'orientation, des brins pour la synthèse ds liaisons phosphodiesters. 

Edited February 25, 2018 by Bjornkotedefer

[Laeress]

Pour compléter la réponse de @Bjornkotedefer : ce n'est pas tant le fait d'avoir des bords complémentaires qui fait que des bouts en baïonnette peuvent s'apparier, c'est surtout que la complémentarité n'empêche pas l’accolement (ouais déso, je sais pas mieux le dire ). 

En fait dans l'absolu, pour avoir une liaison il te faut un 5'phosphate et un 3'OH libres, pas besoin de coupe en baïonnette.

Tu peux apparier 2 bouts en baïonnette ensemble ou 2 bouts francs ensemble. Par contre, tu ne pourras pas lier un bout en baïonnette et un bout franc: il te manquera des bases.

N'hésite pas si t'as pas compris!

[Cath]

Ah ok j'ai compris, donc en fait si j'ai une enzyme de restriction qui coupe GG/TA et une autre qui coupe TCC/AGG, les deux morceaux pourront s'apparier parce que ce sont des bouts francs ? 

En tout cas merci à vous deux ! 

[Laeress]

Oui voilà

Avec plaisir!