HadjDh Posted December 2, 2017 Share Posted December 2, 2017 Salut quelqu'un pour me dire ce qu'est la différence entre l'amplification parasite et les contamination svp ? Link to comment Share on other sites More sharing options...
SBW Posted December 2, 2017 Share Posted December 2, 2017 Salut ! je crois que tu observe la même chose au final, mais amplification parasite => amorces appariées ailleurs que voulu, donc tu as amplifié une autre séquence, ou bien température trop faible donc amorces mal appariées à une séquence non voulue contamination => la hantise de ce cher T Levade, tu as introduit de l'adn autre que celui a amplifier dans le tube A confirmer bien sur ! Link to comment Share on other sites More sharing options...
Son-Goku Posted December 2, 2017 Share Posted December 2, 2017 Pour compléter ce qu'a dir Victor: Parasite: il s'agit d'amplicons généralement moins marqués (tache moins claire) et plus petits (migre moins loin) que le fragment que tu souhaites amplifier au départ. cela peut signifier, comme La dir Victor, que tu as mal choisi t'es amorces ou enxore qu'il y'a eu des appariement partiel du à un manque de stringence. Il faut donc augmenter la température ( pas trop sinon les amorces ne peuvent pas sapparier !) et bien choisir ses amorces. Pour la contamination, il y a une légère nuance: on a apparition damplicon dans le tube témoin qui contient tout les réactifs sauf le fragment à amplifier, ce qui n'est pas normal tu en conviendras: il y a contamination. Elle est La hantise de notre cher mr levade car elle peut fausser les résultats ! Cest les notes que j'ai prise durant son cours hier, si quelquun a autre chose à apporter ou peut me corriger je suis preneur Link to comment Share on other sites More sharing options...
SBW Posted December 2, 2017 Share Posted December 2, 2017 yes sur la contamination : il est nécessaire de suivre un parcours précis dans e laboratoire de manière à limiter les risques en ne faisant pas d'allés et retour ! aussi à partir du moment où l'on fait une PCR il est impératif de faire exactement ma même manip dans un autre tube, mais sans les Acides nucléiques que l'on souhaite étudier : si l'on obtient des amplifions, c'est très très mauvais : cela signifie que des acides nucléiques non désirés se sont insérés dans la préparation (on sentait la terreur dans les yeux du prof à se moment du cours, c'était magique) Merci d'avoir complété gokuleprimant motivé (félicitations ) ! Link to comment Share on other sites More sharing options...
HadjDh Posted December 2, 2017 Author Share Posted December 2, 2017 Merci ! Ca vous dit de faire une reccap pour la meilleure réponse svp ? ^^ Link to comment Share on other sites More sharing options...
Solution SBW Posted December 3, 2017 Solution Share Posted December 3, 2017 Salut ! je crois que tu observe la même chose au final, mais amplification parasite => amorces appariées ailleurs que voulu, donc tu as amplifié une autre séquence, ou bien température trop faible donc amorces mal appariées à une séquence non voulue En fait il s'agit d'amplicons généralement moins marqués (tache moins claire) et plus petits (migre moins loin) que le fragment que tu souhaites amplifier au départ. cela peut signifier, que tu as mal choisi t'es amorces ou enxore qu'il y'a eu des appariement partiel du à un manque de stringence. Il faut donc augmenter la température ( pas trop sinon les amorces ne peuvent pas sapparier !) et bien choisir ses amorces. contamination => la hantise de ce cher T Levade, tu as introduit de l'adn autre que celui a amplifier dans le tube il y a une légère nuance: on a apparition damplicon dans le tube témoin qui contient tout les réactifs sauf le fragment à amplifier, ce qui n'est pas normal tu en conviendras: il y a contamination. Elle est La hantise de notre cher mr levade car elle peut fausser les résultats ! il est nécessaire de suivre un parcours précis dans e laboratoire de manière à limiter les risques en ne faisant pas d'allés et retour ! aussi à partir du moment où l'on fait une PCR il est impératif de faire exactement ma même manip dans un autre tube, mais sans les Acides nucléiques que l'on souhaite étudier : si l'on obtient des amplifions, c'est très très mauvais : cela signifie que des acides nucléiques non désirés se sont insérés dans la préparation Link to comment Share on other sites More sharing options...
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