QCM 6 3ème partie (exo entrainement)

[malika]

Salut  

 

J'ai une question concernant l'exercice que vous trouverez en pièce jointe: 

 

En fait il s'agit d'une PCR sur un ADNc, et je ne comprends pas comment on peut faire une PCR sur un ADNc car on a  2 amorces et donc normalement 2 brins ( chaque amorce étant censée s'hybrider sur 1 brin). Réplique t'on l'ADNc? 

 

Merci d'avance  

 

http://hpics.li/3eb9423

http://hpics.li/e211eb8

[Clemsoin]

Ta question est pourquoi il y a 2 amorces lors q'une PCR?

 

Si tu regarde la diapo "principe de la PCR (1)  tu vois que pour la PCR, on va synthétisé 2 amorces qui vont venir s'hybrider (dans l'orientation 5'3' !!) face à face sur deux brins complémentaire.

Puis ensuite on va faire des cycles de dénaturation-hybridation-ADN pol (=élongation) une 30aine de fois.

 

On se retrouvera avec 2ⁿ brin courts (cad le génotype correspondant à la séquence entre tes 2 amorces)

2n brin long

(Et les 2 brins matrice de départ)

 

As-tu compris l'item D?

[Theodore_de_M]

Bonjour , j'ai peur de ne pas vraiment saisir ce qui te tracasse. Mais je vais essayer de répondre simplement . La séquence qui est fournie, est un ADNc ( présence de T remplaçant le U )dont la séquence est calquée sur l'ARNm du gène de la phospolipase A. On veut d'après l'énoncé amplifier l'exon 2,donc il faut comme tu le penses , répliquer l'ADNc. Du moins imaginer le brin complémentaire du brin donné pour te permettre de déterminer les amorces nécessaires pour la PCR. Ainsi , en sachant que tes amorces doivent être positionnées pour une synthèse de 5' en 3' sur chacun des 2 brins , tu peux déterminer la séquence des amorces .

Tu te souviendras d'ailleurs que le prof a insisté sur le fait que le meilleur moyen pour étudier une séquence d'ADN , n'est pas de l'isoler du flot d'ADN de nos cellules (trop difficile) mais de synthétiser de l'ADN à partir d'ARNm correspondant en passant par un ADNc.

Mon explication est une peu alambiquée, mais j'espère t'avoir un tant soit peu éclairé.

[malika]

En fait je voulais savoir si l'ADNc subissait une réplication, je me suis mal exprimée excusez moi... 

Achille Talon a parfaitement répondu à mes interrogations  

 

Merci à vous deux !!