Incorporation d'atomes radioactifs

[SabaanOu]

Bonjour la tuto-sphère !

 

Comment fait-on, à partir d'une séquence donnée,  pour savoir si un atome radioactif est incorporé ou pas ?

 

par exemple :

 

    si on nous dit dans l'énoncé : "on fait agir une ADN polymérase en présence de dCTP marqué H3, dGTP marqué P32 sur P(alfa), et d'ATP marqué C14." Et on nous pose comme question par exemple :

 

--> "on observe une éventuelle incorporation de P32"

 

Comment je sais, à partir d'une séquence donnée, s'il a été incorporé ou pas ?

 

 

Merci !

[Guest audrey10161]

Bonjour, alors en gros il faut se fier à quel phosphate est radioactif. Si c'est l'alpha alors tout les  dGTP seront marqués par contre si c'est gamma uniquement le premier nucléotide peut être marqué car c'est le seul à garder ses 3 phosphates. Ainsi, si le premier nucléotide n'est pas un GTP et qu'on propose un phosphate marqué alpha sur les GTP il ne sera pas incorporé. 

Dans ce cas précis vu que c'est un phosphate alpha qui est marqué tout les dGTP seront marqués. 

[SabaanOu]

super clair merci !