Annale session 2 2024 item 2)E

[Pollux200380]

Bonjour, dans l’annale session 2 du 28 mai 2024, l’item 2)E est compté vrai dans la correction. Mais je ne comprends pas pourquoi car justement le plasmide 3 est dans le mauvais sens. Pouvez-vous m'expliquer ? Merci

Edited March 21 by Pollux200380

[Hélie]

Salut ! Alors la PCR c’est un technique qui permet, à partir d’une amorce de continuer à synthétiser le brin qui est en face par complémentarité. On voit qu’il y à une amorce 

La proposition E est vraie car les amorces 1 (située sur le plasmide pTG, en amont du site d’insertion) et 3 (située sur le fragment du gène du facteur IX) ne permettent une amplification PCR que si le fragment est bien inséré dans le plasmide. De plus, comme l’amorce 3 est orientée dans un sens précis sur la partie insérée, l’amplification ne se produit que si elle est dans la bonne orientation par rapport à l’amorce 1. Ainsi, la présence ou l’absence d’un produit PCR permet à la fois d’identifier les plasmides recombinants et de déterminer le sens d’insertion du fragment. 

 

L’amorce 3 est fixée sur le gène du facteur IX avec une orientation précise. Si le fragment est inséré “dans le mauvais sens”, alors les amorces 1 et 3 sont dos à dos ou mal orientées

-> la polymérase ne peut pas amplifier

-> pas de produit PCR.

 

En revanche, si le fragment est dans le “bon sens”, les amorces 1 et 3 se font face

-> il y a amplification

-> produit PCR détectable.

 

Donc le fait que “le plasmide 3 soit dans le mauvais sens” explique justement pourquoi la PCR permet de distinguer les orientations :

produit = bon sens

pas de produit = mauvais sens

 

C’est pour ça que la proposition E est vraie : la PCR avec amorces 1 et 3 ne sert pas seulement à dire “il y a une insertion”, mais aussi dans quel sens il est inséré.

 

J’espère que c’est plus clair ! Mais en tout cas ton raisonnement n’est pas faux et c’est pour ça que c’est vrai !

Edited March 21 by Hélie

[Pollux200380]

merci !