Annale session 1 2022 item 3

[Pollux200380]

Bonjour, dans l’annale session 1 du 23 mars 2022, je ne comprends pas comment nous pouvons faire pour répondre aux items 3)B et 3)C. Pouvez-vous m’expliquer ? Merci

Edited March 21 by Pollux200380

[An-Schwann]

Salut!

Déjà il faut comprendre ce qu'on fait dans ce QCM. On a modifié génétiquement nos cellules endothéliales en culture avec le plasmide C. On cherche maintenant a déterminer lequel on intégrer le plasmide et exprimé l'ADNc d'intérêt. Pour cela on fait une RT-PCR. La RT-PCR, c'est comme une PCR Normal, sauf qu'elle est précédé par une étape de reverse transcription. Sela permet de synthétisé de l'ADN a partir de l'ADN qu'on amplifie ensuite par PCR. En gros pense le comme une PCR pour l'ARN. Quand l'ARN est présent, la RT-PCR fonctionnera et donc on aura des brins d'ADN qu'on pourrait détecté. Si on a pas d'ARN, cela me fonctionnera pas. 

On peut donc utiliser cette technique pour voir quelle ligné de cellule exprime l'ADNc (=le transcrit en ARN) 

 

Passons au item : 

B : ici on compare la lignée 1 et 2. On remarque que sur la lignée 2, on a pas de marque. Cela nous indique la RT-PCR n'a pas pu amplifier d'ARN. Si il n'y a pas d'ARN, ça veut dire que gène n'est pas exprimé dans le lignée 2, l'item est faux 

C : si la lignée n'exprimait pas le gène 1, alors l'amorce 2 utiliser pour la RT-PCR n'aurai rien à se lié, on aurait aucune marque. Or, lorsqu'on utilise l'amorce 2, on voit qu'on détecte bien quelque chose sur la colonne B et C de la lignée 1, cela nous indique que la RT-PCR a bien fonctionné, et donc que le gène 1 est bien exprimé, l'item est faux 

 

C'est plus claire?

[Pollux200380]

oui, merci !