Analyse

[heaven]

Bonjour je n’arrive pas à repondre à ce qcm est ce que quelqu’un pourrait m’aider?

merci

https://ibb.co/QSj0TgS

[Androma]

Salut !

 

Ici on veut mettre l'ADN codant pout YFP, une protéine fluorescente, du plasmide B, devant un promoteur eucaryote cardio spécifique dans le plasmide A.

 

A. FAUX : Le plasmide d'intérêt est le plasmide A. On est dans des bactéries, donc l faut regarder le promoteur procaryote. Il code pour une résistance à l'ampicilline, et pas à la kanamycine.

 

B. FAUX : lorsque tu coupes le plasmide B avec BamH1 et HindIII, Le site de BamH1 est au début de l'ADNc, du côté du codon ATG, et HindIII à la fin, du côté du codon STOP TGA. Dans le plasmide A, BamH1 est avant HindIII, ainsi l'ADNc est dans le bon sens.

 

C. VRAI : On a une borne HindIII avant et après YFP, et une borne dans le plasmide A juste après le promoteur cardio spécifique, dans l'ADNc pourra s'insérer. 

 

D.VRAI : Comme pour HindIII, il y a des bornes pour Xba1 avant et aprèe YFP et après le promoteur. Comme on a la même enzyme de chaque côté du l'ADNc, le gène peut s'insérer dans les deux sens, c'est ce qu'on appelle un clonage non orienté. Pour avoir un clonage orienté, et donc contrôler le sens d'insertion du gène, il faut utiliser 2 enzymes différentes, par exemple ici BanH1 et HindIII dans la question B.

 

E. FAUX : Il faut encore regarder le plasmide A, mais cette fois-ci le promoteur constitutif eucaryote. Il est devant un gène de résistance à l'hygromycine, et non la puromycine.

 

Voilà, j'espère que c'est plus clair pour toi, n'hésite pas si tu as des questions !