Chromatographie d’affinité

[Maribosome_]

bonjour, pour la chromatographie d’affinité j’ai du mal à me représenter les étapes sur le graphique de chromatographie et la différence entre élution avec un palier et élution avec un gradient. Est ce que quelqu’un pourrait me l’expliquer sur un chromatogramme ? Merci !

[An-Schwann]

Salut! Désolé de la réponse tardive 

j’imagine que c’est par rapport a ce schéma : 

Le plateau d’absorbance au début est du a toute les protéines qui ne sont pas lié sur la phase stationnaire, qui traverse la colonne et son récupéré. Ensuite on va élué la protéine d’intérêt pour la récupéré. Ce schéma représente une élution par palier. Comme on peut voir sur la ligne rouge par rapport au condition d’élution, on passe d’un niveau ou on a rien, directement à un niveau supérieur sans passé par un intermédiaire, un peut comme une marche.

Une élution par gradient resemblerai à ca: 

Ou on augmente progressivement notre condition d’élution. Par exemple dans une chromatographie échangesue d’ion, on va augmenter progressivement la force ionique de notre tampon d’élution. 

Si ce n’est pas claire, n’hésite pas de me le dire!

 

[Maribosome_]

Merci !