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annale technique adn


Go to solution Solved by An-Schwann,

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Salut je ne comprend pas ce qcm ces l'annale 2023 2024 session 1 item C et l'item D et tres moyennement l'item B quelqu'un pourrait m"éclairer j'ai du mal a comprende ce genre de qcm 

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Salut! 

Je vais passé item par item :

Item B : Si on a un plasmide recombinant, Nco1 va extraire le fragment contenant l’ADNc codant le facteur IX, de 1800 pb, et un fragment contenant le promoteur grace à la coupure réalisé par xmn1 de 830 pb, et un troisième bou qui est juste le reste du plasmide.

si on a pas un plasmide recombinant, alors la coupure de ces deux enzymes coupera autour du promoteur, donnant un fragment de 830 pb et va libéré le reste du plasmide

donc on a deux cas : 1) on a le plasmide recombinant, dans ce cas on aura donc trois morceau après cette digestion. 2) le plasmide n’a pas intégré l’ADNc voulu, dans ce cas on aura que deux morceau.

ducoup on pourra bien vérifier si on a un plasmide recombinant ou pas juste en faisant une digestion par Xmn1 et Nco1. 

 

Item C: Dans cette item on cherche le plasmide d’intérêt, c’est a dire le plasmide ayant intégré l’ADNc dans le bon sens. Quand on observe notre ADNc d’intérêt dans le plasmide FIX, on remarque qu’il possède un site de coupure Hindlll, et que ce site de coupure n’est pas au centre de l’ADNc. Donc si on coupe par Hindlll, on aura un résultat différent en fonction du sens d’insertion de l’ADNc. Une digestion par Hindlll permettra bien de séléctionner les plasmide d’intérêt. 

 

item D : Ici on fait une PCR, en utilisant les amorces 1 et 2. En faisant cette PCR, on aura ca va répliqué l’ADN entre les deux amorces. Si le plasmide est recombinant, c’est a dire qu’il a intégrer de l’ADNc, alors la PCR lors de la replication, va répliquer le fragment d’ADNc insérer car le site d’insertion ce trouve entre les deux amorces. 

 

En gros ici il faut faire attention a ce qu’il te demande: soit c’est juste est ce qu’on a un plasmide recombinant (qui a insérer de l’ADNc, que ce soit à l’envers ou dans le bon sens)? Ou est ce que c’est dans le bon sens? 

 

C’est plus claire? 🦈

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