QCM 4 techniques d’études de l’ADN

[e_lyse]

Bonjour,

Concernant le QCM 4 du poly du TAT sur les techniques d’études de l’ADN, je ne comprends pas bien la correction de l’item D :

QCM 4 - Parmi les propositions suivantes, quelle(s) est(sont) la(les) réponse(s) vraie(s) :

A. Si la cassette d’expression et le plasmide sont digérés par Nnn et Yyy, l’insertion est dite « orientée ».

B. Si la cassette d’expression et le plasmide sont digérés par Nnn et Kkk, le vecteur recombinant possédera

plusieurs cadres de lecture pour le gène dnsLMSN.

C. Des fibroblastes de souris sont transfectés avec des vecteurs recombinants. Si ces cellules expriment la

GFP , la présence du gène dnsLMSN dans leur génome est certaine.

D. Ces mêmes fibroblastes expriment obligatoirement la Limousine.

E. Le vecteur recombinant (digestion de la cassette et du plasmide par Nnn et Kkk) transfecté à ces mêmes

fibroblastes avait une taille de 7,4 kb.
Correction : 

QCM 4 - ACDE

B. Il n’y a qu’un seul cadre de lecture car l’insertion est orientée (digestion par deux enzymes différentes et

incompatibles). L’insertion est non orientée si par exemple une même enzyme de restriction est utilisée

pour ouvrir le plasmide.

D. (Vrai) La GFP et dnsLMSN sont dans le même cadre de lecture ouvert, on considère donc que si l’un est

exprimé lautre est aussi présent dans le génome. Attention par contre ce n’est pas parce qu’un gène est

présent qu’il sera forcément exprimé !

 

Justement, il peut être présent mais pas forcément s’exprimer non ? 

 

En plus, l’item E du QCM 5 est donné faux, ce qui me semble en contradiction avec celui là (QCM 5, item E : Un fibroblaste ne présentant aucune fluorescence verte n’a pas intégré le transgène., correction :  E. Il peut avoir intégré le transgène sans pour autant l’exprimer)

 

Merci d’avance !

[An-Schwann]

2 hours ago, e_lyse said:

Bonjour,

Concernant le QCM 4 du poly du TAT sur les techniques d’études de l’ADN, je ne comprends pas bien la correction de l’item D :

QCM 4 - Parmi les propositions suivantes, quelle(s) est(sont) la(les) réponse(s) vraie(s) :

A. Si la cassette d’expression et le plasmide sont digérés par Nnn et Yyy, l’insertion est dite « orientée ».

B. Si la cassette d’expression et le plasmide sont digérés par Nnn et Kkk, le vecteur recombinant possédera

plusieurs cadres de lecture pour le gène dnsLMSN.

C. Des fibroblastes de souris sont transfectés avec des vecteurs recombinants. Si ces cellules expriment la

GFP , la présence du gène dnsLMSN dans leur génome est certaine.

D. Ces mêmes fibroblastes expriment obligatoirement la Limousine.

E. Le vecteur recombinant (digestion de la cassette et du plasmide par Nnn et Kkk) transfecté à ces mêmes

fibroblastes avait une taille de 7,4 kb.
Correction : 

QCM 4 - ACDE

B. Il n’y a qu’un seul cadre de lecture car l’insertion est orientée (digestion par deux enzymes différentes et

incompatibles). L’insertion est non orientée si par exemple une même enzyme de restriction est utilisée

pour ouvrir le plasmide.

D. (Vrai) La GFP et dnsLMSN sont dans le même cadre de lecture ouvert, on considère donc que si l’un est

exprimé lautre est aussi présent dans le génome. Attention par contre ce n’est pas parce qu’un gène est

présent qu’il sera forcément exprimé !

 

Justement, il peut être présent mais pas forcément s’exprimer non ? 

 

En plus, l’item E du QCM 5 est donné faux, ce qui me semble en contradiction avec celui là (QCM 5, item E : Un fibroblaste ne présentant aucune fluorescence verte n’a pas intégré le transgène., correction :  E. Il peut avoir intégré le transgène sans pour autant l’exprimer)

 

Merci d’avance !

salut!

Dans le QCM 4 D on prend le cas ou on a des fibroblaste, qui ont été transfécter par le vecteur recombinant, et qui exprime la GFP. Si on regarde a notre construit, on peut voir que la GFP est après un promoteur eucaryote, entre le promoteur et l'ADN codant la limousine., donc si GFP est exprimer, ca va obligatoirement exprimer la limousine. Lorsque la machinerie cellulaire transcrit cette partie de notre construit, ca va faire un transcrit contenant à la fois la GFP et l'ARN codant la limousine. 

dans la 5E, on parle de l'expression de la GFP. Si le plasmide a été intégré il peut ou pas exprimer la GFP, cela n'est pas obligatoire 

En gros ici, si la GFP est exprimé alors aussi la limousine, du a la facon que notre trasncrit est fait. 

c'est plus claire? 

En gros, avec ce construit, il est pas possible d'exprimer la limousine sans exprimer la GFP, donc si on sait que la GFP est exprimer, alors la limousine aussi 

[e_lyse]

Aaaaah oui okk merci !