BusyLizzy Posted September 23 Posted September 23 Bonsoir, à la suite du TD 1 de biocell d'aujourd'hui, j'ai une petite question à propos de la coloration négative : est-ce qu'elle se substitue à l'ombrage métallique, et est donc réalisée après une cryofracture ou un cryodécapage (cf. IP techniques biocell) ? Si oui, nécéssite-t-elle la réalisation d'une réplique à sa suite ? Ou, est-ce qu'il s'agit d'une technique à part de la cryofracture/cryodécapage ? Merci d'avance ! Et par ailleurs, l'image de l'échantillon dépend-elle de si on a réalisé une cryofracture ou un cryodécapage ? Les techniques sont-elles utilisés pour visualiser la surface et/ou le relief de l'échantillon ? Quote
Tuteur Solution Lénadénine Posted September 23 Tuteur Solution Posted September 23 Salut! En ce qui concerne la coloration négative: c’est une technique indépendante de la cryofracture, elle est surtout utilisée pour observer des particules isolées comme les virus en MET. Le principe de cette technique est qu’on dépose l’échantillon sur une grille et on l’entoure d’un sel lourd, on aura donc les contours qui vont apparaître car le sel lourd ne rentre pas dans la structure. Ici il n’y a donc pas de réplique car on observe directement l’objet. L’ombrage métallique: ici après cryofracture, on projette un film métallique très fin sur l’échantillon, ça sert à donner du relief et du contraste, on a donc ici une réplique. La cryofracture/décapage: c’est une technique appliquée à des membranes congelées. On fracture puis on décape la surface et après sur ça on fait un ombrage métallique pour créer la réplique qui est observée en MET. Donc la coloration négative est une technique différente et utilisée dans d’autres contextes que l’ombrage métallique. Est ce que j’ai répondu à ta question ? Fodiliaque 1 Quote
BusyLizzy Posted September 23 Author Posted September 23 Ok, donc, si j'ai bien compris : cryofracture/décapage précède un ombrage métallique, mais ne sont pas utilisés pour une coloration négative (car c'est une tachnique indépendante). Mais, est-ce que la cryofracture est plus adaptée pour une certaine visualtion (surface ?) de l'échantillon tandis que le cryodécapage est meilleur pour la visualition de reliefs ? Quote
Tuteur Lénadénine Posted September 23 Tuteur Posted September 23 Oui tu as bien compris ! Oui en général on utilise plus la cryofracture seule pour l’observation de surfaces mambranaires. Tandis que pour l’observation de reliefs plus profonds on utilise la cryofracture et le cryodécapage ensemble. An-Schwann 1 Quote
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