Résolution QCM

[noidonthaveagun]

Bonjour ! 

Est-ce que quelqu'un pourrait m'expliquer comment résoudre ces QCM svp ? Et comment ne pas tomber dans les pièges ? Merci ! 

 

1 : https://ibb.co/VYZm3VJW

2 : https://ibb.co/MyGRSM3F

3 : https://ibb.co/3KKyCx2

 

Avec ce support : https://ibb.co/mVhxXKZ1

[RickC-137]

Coucou, 

Est-ce que tu pourrais spécifier de quelles annales il s'agit stp ? 

Mercii 

 

[noidonthaveagun]

@RickC-137 C'est l'annale session 1 de 2021-2022

[RickC-137]

Ok alors pour ce genre de QCM il est très important d'être au point sur toutes les techniques vues en cours et plus précisément il faut savoir lire les résultats et ce que la technique permet de mettre en évidence. Avec ça déjà tu pourras répondre à quelques items où les pièges portent exclusivement sur les deux choses que je viens de citer.

Ensuite c'est important de bien comprendre l'expérience qui est faite et de ne pas se noyer dans des énoncés qui sont parfois longs mais qui ne contiennent pas forcément que des infos utiles. Pour cela on te conseille de faire des petits schémas sur ton brouillon des étapes ou des plasmides recombinants qui ne sont pas forcément donnés par exemple. Aussi, tu peux surligner les infos importantes pour ne pas les oublier plus tard. 

Voila c'est des conseils généraux mais qui fonctionnent réellement si tu fais le max de qcm, en plus tu verras tu seras de plus en plus rapide à les résoudre. 

Pour les QCMs portant sur les plasmides vérifie que les promoteurs sont adéquats ( procaryote/eucaryote) et le sens d'insertion de l'ADN par rapport à ce promoteur et ça devrait te permettre de résoudre pas mal d'items assez facilement et d'éviter des pièges.

Voila, désolée pour cette réponse un peu tardive mais j'espère qu'elle a pu t'aider quand même ! Bon courage à toi! 

[noidonthaveagun]

@RickC-137 Oui ok mais en je ne comprends toujours pas la correction du QCM 2 https://ibb.co/MyGRSM3F à l'aide de ça https://ibb.co/mVhxXKZ1

[jlr.10]

Salut @noidonthaveagun !

 

Tout d’abord il faut bien comprendre ce que l’on fait :

• 1) on prend le plasmide pA et on le digère par l’enzyme de restriction HindIII. Tu remarque qu’il y a 2 sites de restrictions HindIII qui se trouve de part et d’autre du fragment d’ADN qui nous intéresse (= le promoteur eucaryotes cellules endothéliales spécifique). Par conséquent on se retrouve à « enlever » le fragment de 600pb qui nous intéresse et qui correspond au promoteur eucaryote cellules endothéliale spécifique. Ce promoteur permettra alors l’expression des gènes qui lui sont dépendants uniquement chez les eucaryotes et uniquement au niveau des cellules endothéliale (qui sont les cellules qui forme l’épithélium des vaisseaux sanguins). 

 

• 2) On digère le plasmide pB avec HindIII, tu remarque que sur ce plasmide on ne retrouve qu’un seul site de restriction HindIII. Cette digestion du plasmide pB ne sert qu’à ouvrir le plasmide. 

 

• 3) On met ensemble le fragment de 600pb (récupéré à partir du plasmide pA) qui est le promoteur eucaryotes cellules endothéliale spécifique, avec le plasmide pB ouvert. Ce qui nous permet d’obtenir en théorie, le plasmide C. 

 

• 4) Il est important de voir que le plasmide C n’est rien d’autre que le plasmide pB au quel on a ajoutée le promoteur « eucaryotes cellules endothéliale spécifique » qui va alors contrôler l’expression des gènes 1 et 2. 

 

Une fois que l’on a compris cela on peut répondre aux différents items : ABE

 

A) Vrai : En effet le plasmide que l’on cherche à obtenir en faisant cette experience est le plasmide C. Et sur ce plasmide on voit bien que les gènes 1 et 2 sont sous le contrôle d’un promoteur tissus spécifique qui est ici, le promoteur eucaryotes cellules endothéliale spécifique. Cela signifie que grace à ce promoteur les gènes 1 et 2 ne serons exprimés que au niveau des cellules endothéliale (qui se trouve au niveau des vaisseaux sanguins) chez des être eucaryotes. 

 

B) Vrai : En effet si tu regard bien ton plasmide B tu remarque que les gènes 1 et 2 ne sont sous le contrôle d’aucun promoteurs. Or le promoteur est un élément indispensable pour permettre la transcription d’un gène en ARNm, sans promoteur l’ARNpolymérase ne fera rien sur ce gène. Ainsi sans promoteur en amont, les gènes 1 et 2 ne seront pas transcrit. 

 

C) Faux : Pour faire ce clonage nous utilisons la même enzyme de restriction pour couper de part et d’autre de notre fragment d’ADN de 600pb, donc une fois celui-ci coupé il pourra s’insérer dans les deux sens. Ce clonage n’est donc pas orienté. 

 

D) Faux : Alors effectivement pour sélectionner des bactéries qui portent le plasmide qui nous intéresse, on les met en culture en présence d’un antibiotique pour lequel seules les bactérie possédant la résistance à cet antibiotique et donc le plasmide d’intérêt, pourront résister. Or ici le gène codant la résistance à l’antibiotique G418 est bien présent sur le plasmide C, mais  ce gène de résistance à l’antibiotique G418 est sous le contrôle d’un promoteur eucaryotes !!!. Ainsi ce gène de résistance ne pourra pas s’exprimé chez les bactéries (qui sont des être procaryotes). Ainsi en présence de cette antibiotique G418 toutes les bactéries mourront quelles aient le plasmide C ou pas. 

 

E) Vrai : L’amorce 1 se fixe sur le promoteur eucaryotes cellules endothéliales spécifique. Ainsi la PCR avec les amorces 1 et 3 pourra se faire sur les bactéries portant le plasmide C (et donnera d’ailleurs une bande à la taille d’environ 1600pb (≈ 1800-200).

En revanche le plasmide B ne porte pas le promoteur eucaryotes cellules endothéliales spécifiques, ainsi l’amorce 1 ne pourra pas se fixer sur ce plasmide, et donc la PCR avec les amorces 1 et 3 ne fonctionnera pas sur les bactéries portant le plasmide vide (= le plasmide n’ayant pas recut le fragment de 600pb = le promoteur eucaryotes cellules endothéliales spécifique = plasmide B), nous n’obtiendront aucun résultat de cette PCR.

Ainsi par une PCR avec les amorces 1 et 3 on sera capable de différentier les bactéries ayant le plasmide C (puisqu’on aura un résultat avec cette PCR) et les bactéries qui n’auront pas le plasmide C (puisqu’elles auront le plasmide B qui ne donne aucun résultat avec cette PCR).

 

J’espère que cela est plus claire et désolé pour cette réponse tardive

Bon courage ! N’hésitez pas si tu as d’autres questions.