Technique d’étude du vivant

[Vante]

Bonsoir, 

 

je ne n’arrive pas à retrouver la taille du fragment « le plasmide recombinant obtenu coupé par BamH1 libère un fragment unique de taille 5850 pb » compté comme vrai. https://ibb.co/BHTbx7R3

ainsi que ce qcm : https://ibb.co/8tddjdq compté vrai aussi.

« le plasmide recombinant coupé par HindIII donnera deux fragments d’ADN de 1240 et 4800 pb »

 

merci d’avance!

Edited March 4 by Vante

[PetiteComète]

Coucou, est-ce que tu pourrais nous donner les références des 2 qcms ? Car sans cela on ne peut pas reconstituer le plasmide recombinant

[Vante]

Ah oui mince désolé je les remets direct

il s’agit pour le premier du maraîcher 2019  : https://ibb.co/LDfGc0rV 

et l’autre c’est session 2 de 2022/2023 : https://ibb.co/Q3zxxL5Q

[Fodiliaque]

Il y a 23 heures, Vante a dit :

Ah oui mince désolé je les remets direct

il s’agit pour le premier du maraîcher 2019  : https://ibb.co/LDfGc0rV 

et l’autre c’est session 2 de 2022/2023 : https://ibb.co/Q3zxxL5Q

@PetiteComète

[Paulimère]

@Fodiliaque @dzinthesky

[bêta-arezkin]

Bonjour 

Pour le premier il faut faire un calcul pour trouver la taille du plasmide final 

Au niveau du plasmide pProm on preleve 700pb (1500 - 800) parce que les 100pb qui se trouvent entre 1600 et 1500 ne servent à rien donc ils ne seront pas pris en compte dans les calculs 

Au niveau du plasmide plaminine il faut déduire le petit bout entre 1300 et 1350 (donc déduire 50pb) du coup le résultat de la digestion donnera 5150 pb 

Du coup maintenant une fois qu'il ya eu ligation entre ces deux fragments ça nous donne un plasmide recombinant dont la taille est de 5150 + 700 = 5850pb

@Vante n'hésite pas à me taguer si cest toujours pas clair

Pour le deuxième est ce que tu peux mettre l'énoncé stp ?

[Vante]

@bêta-arezkin merci pour ta réponse c’est plus clair ! Mais enfaite c’est perturbant parce que je me fiait à l’item juste, vu qu’on mentionné juste Bamh1 et pas pts1(contrairement à l’énoncé)

 

il y a 37 minutes, bêta-arezkin a dit :

Pour le deuxième est ce que tu peux mettre l'énoncé stp ?

https://ibb.co/hR3c0rsF 

[bêta-arezkin]

Oui justement c'est perturbant mais on s'entraînant on y arrive t'inquiète 

Pour le deuxième : 

On va commencer par poser des bases : une fois que le gène de la chaîne bêta est digéré tout les points de coupure des enzymes vont perdre 50pb (parce que Nco1 enlève les 50 premières pb) du coup le point coupure de HindIII va devenir 640pb. La taille du fragments résultant de la digestion de la chaîne bêta est de

710 - 50 = 660pb 

Maintenant on va parler du plasmide pEXP quand on le digére avec les deux enzymes il va perdre 20pb (vu que Nco1 coupe en 1000pb et que Xba1 coupe en 1020pb) du coup sa taille sera de 5380pb après digestion par les enzymes et donc quand on y ajoute 660 de la chaîne bêta on trouve 6040pb qui est la taille du plasmide recombinant 

Ensuite on sait que le point de coupure de Nco1 est au niveau de 1000pb dans le plasmide pEXP donc la distance entre ce point et le point de coupure de HindIII sur le plasmide c'est 600pb .

Maintenant qu'on a tout ça on va pouvoir calculer :

On prend la distance entre les points de HindIII et Nco1 et on fait une addition avec le point de coupure de HindIII sur le fragments résultant de la digestion de la chaîne bêta et donc ça nous donne (roulement de tambour) :

600 + 640 = 1240 

Et si on déduit cette somme de la taille finale du plasmide recombinant on trouve (suspense) 6040 - 1240 = 4800pb 

Si c'est pas clair tu me tague

[Vante]

C’est tout clair pour moi! Vraiment merci beaucoup!!