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Technique ADN


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Salut dsl de vous déranger mais j’ai un soucis avec ce qcm 

(item:A,D,E) 

C’est le QCM 7 du tat page 122 du poly de pharmacie 

 

  1. Elle doit utiliser les enzymes Bam1 et Xho1 pour réaliser son plasmide recombinant.
  2. Elle doit utiliser les enzymes Hindill et PST1 pour réaliser son plasmide recombinant.
  3. ORI correspond à l'origine de la transcription.
  4. Le plasmide recombinant coupé par les enzymes correctes fait 6780 pb
  5. Après coupure par les 2 enzymes correctes, l'insert ne peut se mettre que dans un seul sens.

Merci d’avance ! 

 

  • Solution
Posted (edited)

Salut ! je remets le schéma pour t'expliquer :

image.thumb.png.11794e34700d3ed25e32f61f0f20aa45.png

A. Si tu regardes d'abord le plasmide SQUEE tu vois que BamH1 puis Xho1 sont juste après le promoteur eucaryote, puis en regardant la séquence à insérer (GFP et P53) tu vois que BamH1 est bien au début de la séquence et que Xho1 est bien à la fin (l'inverse aurait été faux car la séquence aurait été à l'envers dans le plasmide). Donc tu peux bien utiliser ces enzymes pour fabriquer ce plasmide recombinant. Donc Vrai.

D. Pour faire ce calcul, tu cherches la taille de ton plasmide SQUEE moins la portion entre BamH1 et Xho1 qui ne sera pas dans le plasmide recombinant, soit 6200-(1400-1350) = 6200-50 = 6150, que tu vas additionner avec ta séquence codant la GFP et P53 entre BamH1 et Xho1 aussi, soit 1300-670 = 630. Donc 6150+670 = 6780 pb. Vrai.

E. Vu qu'on a coupure par deux enzymes différentes on aura forcément un clonage orienté et donc la séquence ne pourra s'insérer que dans un seul sens. Donc Vrai.

En espérant que ça puisse t'aider !

 

Edited by Ewangi-SprayMaldeGorge

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