C2011 qcm 4 et 5

[Iliana]

Bonjour

 

Je n'arrive pas à mettre les photos (trop grandes) alors si quelqu'un l'a sous les yeux et pourrai mexpliquer litem D du qcm 5 ( en quoi la phosphorylation empêche le plasmide de se refermer je croyais que justement il fallait le dephosphoryler pour eviter ca?)

 

Pour le qcm 6 je ne comprends pas le raisonnement du tout. Et pour les questions de cours (D et E) je pensais quon utilisait un ATP pour la ligation pas un GTP ou un dATP..

 

Merci à la personne qui me répondra

[laureakez]

salut,

juste est ce que tu pourrais me redire sur quels qcms porte tes questions parce je ne vois pas le lien entre la question que tu poses sur la question  5 item D 

Sinon normalement la déphosphorylation des extrémités 5' du plasmide après linéarisation du plasmide l’empêche de se refermer. Et pour faire la ligation après insertion du fragment d'ADN  dans le plasmide recombinant, on utilise la ligase et un ATP

[Iliana]

salut,

juste est ce que tu pourrais me redire sur quels qcms porte tes questions parce je ne vois pas le lien entre la question que tu poses sur la question  5 item D 

Sinon normalement la déphosphorylation des extrémités 5' du plasmide après linéarisation du plasmide l’empêche de se refermer. Et pour faire la ligation après insertion du fragment d'ADN  dans le plasmide recombinant, on utilise la ligase et un ATP

Sur le qcm 4 et 5 du concours 2011

[Gwendoline_sabat]

Tout d'abord désolée pour le retard, comme je ne sais pas exactement de quels QCMs tu as besoin je vais répondre aux 4, 5 et 6 du concours 2011.

QCM 4 :
A : FAUX, une phosphatase retire des groupements phosphates, elle ne phosphoryle pas
B : FAUX, au bout des 25 cycles de PCR la majorité des fragments produits portera la mutation sur les 2 brins
C : FAUX, TAQ fait de nombreuses erreurs et la manipulation ici décrite nécessite de la rigueur (on doit faire une mutation précise)
D : FAUX, la PCR amplifie de l'ADN linéaire
E : VRAI, 0,1 pg = 1*10^-13g. 1*10^-13*3,4*10^7 = 3,4*10^-6 soit 3,4 microgrammes

 

QCM 5 : On te demande ici les raisons pour lesquelles les colonies bactériennes n'ont pas été obtenues.
A : VRAI, la déphosphorylation empêche la fermeture spontanée en présence de ligase et ne permet pas de faire de l'ADN circulaire pouvant être inséré dans la bactérie. Ainsi les bactéries ne peuvent contenir le plasmide et sont donc sensible à l'antibiotique, il n'y a donc pas de colonies.
B : FAUX, cela ne change rien
C : VRAI, si les bactéries ne sont pas rendues compétentes elle ne peuvent pas être transformées par un plasmide, il n'y aura donc pas de colonies.
D et E : VRAI, il s'agit là de GTP et de dATP ne permettant pas la réaction de ligation, les produits de PCR restent donc linéaires et ne peuvent être insérés dans les bactéries, ainsi il n'y a pas de colonies. La molécule nécessaire au bon fonctionnement de la ligase est l'ATP.

QCM 6 :
A et B : FAUX, c'est l'inverse, les bandes noires sont neuronales et les bandes blanches sont hépatiques. Le promoteur inséré dans le plasmide est neuronal, ainsi il ne permettra l'expression du gène en aval seulement dans un neurone. Donc sur le schéma pour le promoteur normal on s'attend à ce que la bande de forte activité luciférase corresponde à un neurone. 
C: VRAI, sur la figure on voit que l'activité dans le neurone chute entre le promoteur normal et le promoteur muté.
D : FAUX, si la portion mutée peut lier TFIID alors il s'agit de la boîte TATA, ce n'est pas la seule portion du promoteur dont la mutation pourrait expliquer le non fonctionnement du promoteur muté.
E : VRAI, peut importe quel facteur lie le promoteur il est vraisemblablement neuronal (d'où la spécificité de ce promoteur) et une mutation empêcherait donc ce facteur de se lier.

[Iliana]

Tout d'abord désolée pour le retard, comme je ne sais pas exactement de quels QCMs tu as besoin je vais répondre aux 4, 5 et 6 du concours 2011.QCM 4 :

A : FAUX, une phosphatase retire des groupements phosphates, elle ne phosphoryle pas

B : FAUX, au bout des 25 cycles de PCR la majorité des fragments produits portera la mutation sur les 2 brins

C : FAUX, TAQ fait de nombreuses erreurs et la manipulation ici décrite nécessite de la rigueur (on doit faire une mutation précise)

D : FAUX, la PCR amplifie de l'ADN linéaire

E : VRAI, 0,1 pg = 1*10^-13g. 1*10^-13*3,4*10^7 = 3,4*10^-6 soit 3,4 microgrammes

 

QCM 5 : On te demande ici les raisons pour lesquelles les colonies bactériennes n'ont pas été obtenues.

A : VRAI, la déphosphorylation empêche la fermeture spontanée en présence de ligase et ne permet pas de faire de l'ADN circulaire pouvant être inséré dans la bactérie. Ainsi les bactéries ne peuvent contenir le plasmide et sont donc sensible à l'antibiotique, il n'y a donc pas de colonies.

B : FAUX, cela ne change rien

C : VRAI, si les bactéries ne sont pas rendues compétentes elle ne peuvent pas être transformées par un plasmide, il n'y aura donc pas de colonies.

D et E : VRAI, il s'agit là de GTP et de dATP ne permettant pas la réaction de ligation, les produits de PCR restent donc linéaires et ne peuvent être insérés dans les bactéries, ainsi il n'y a pas de colonies. La molécule nécessaire au bon fonctionnement de la ligase est l'ATP.QCM 6 :

A et B : FAUX, c'est l'inverse, les bandes noires sont neuronales et les bandes blanches sont hépatiques. Le promoteur inséré dans le plasmide est neuronal, ainsi il ne permettra l'expression du gène en aval seulement dans un neurone. Donc sur le schéma pour le promoteur normal on s'attend à ce que la bande de forte activité luciférase corresponde à un neurone.

C: VRAI, sur la figure on voit que l'activité dans le neurone chute entre le promoteur normal et le promoteur muté.

D : FAUX, si la portion mutée peut lier TFIID alors il s'agit de la boîte TATA, ce n'est pas la seule portion du promoteur dont la mutation pourrait expliquer le non fonctionnement du promoteur muté.

E : VRAI, peut importe quel facteur lie le promoteur il est vraisemblablement neuronal (d'où la spécificité de ce promoteur) et une mutation empêcherait donc ce facteur de se lier.

Merci énormément *-*