PCR

Holavache · October 14, 2024

Bonjour je viens vers vous pour vous demander si vous pouvez m'aider sur le cours concernant la PCR. Enfaite je pense que j'ai à peu pré compris le cours ( mais bon c'est même pas sûre ) mais il y a un détail que j'arrive vraiment pas a comprendre . j'ai compris que la PCR était une technique d'amplification de l'ADN et tout cas mais je comprends pas comment à partir de l’expérience d'amplification on arrive à donner un résultat, en gros comment on arrive à évaluer la PCR grâce au deux méthodes que la prof a détaillée ( par migration des fragments sur gel d’électrophorèse et par mesure de fluorescence). j'aimerai vraiment savoir parce que quand je comprend pas un truc d'un cours ça me bloque pour le cours dans son intégralité.

merciiii beaucoup pour vos futures réponses et certainement à bientôt :)

Aaronigashima · October 14, 2024

2 hours ago, Holavache said:

Bonjour je viens vers vous pour vous demander si vous pouvez m'aider sur le cours concernant la PCR. Enfaite je pense que j'ai à peu pré compris le cours ( mais bon c'est même pas sûre ) mais il y a un détail que j'arrive vraiment pas a comprendre . j'ai compris que la PCR était une technique d'amplification de l'ADN et tout cas mais je comprends pas comment à partir de l’expérience d'amplification on arrive à donner un résultat, en gros comment on arrive à évaluer la PCR grâce au deux méthodes que la prof a détaillée ( par migration des fragments sur gel d’électrophorèse et par mesure de fluorescence). j'aimerai vraiment savoir parce que quand je comprend pas un truc d'un cours ça me bloque pour le cours dans son intégralité.

merciiii beaucoup pour vos futures réponses et certainement à bientôt :)

Salut,

‘comme tu l’as dit la PCR est une méthode d’amplification de l’ADN et à pour but donc de détecter si un gène est présent dans une partie de l’ADN grâce a 3 étapes (dénaturation, hybridation, élongation).

Pour savoir si un gène est présent :

2 facons :
Utiliser nucleotide fluorescent (cyber green) dans preparation ou gel d'electrophorese. → reticula (chimique) souvent agarose → en se refroidissant ca cree un gel (ça marche un peu comme piscine a bulle, si on court de l'autre cote, on va plus vite si on est petit et mince, l'ADN c pareil, un petit ADN va migrer plus vite dans le gel qu'un gros). L’ ADN charge – migre vers pole + du gel ; plus c petit plus ça va migrer loin.
Coloration flurorescente → selon leur marqueur de taille (connu) on compare avec ADN du patient. S'il y a une bande coloree → il y eu replication → gene est present

Voila mes notes de l’année dernière du cours, si tu ne comprends toujours pas je pense que @POMME sera bien plus apte que moi à te l’expliquer.

Bonne journée !

Creeper · October 14, 2024

Coucou @Holavache

Les explications de @Aaronigashima me semblent claires ; j'aimerai juste te rajouter quelques images qui pourraient t'aider à visualiser ces deux techniques :

La première image représente le résultat d'un gel d'électrophorèse : on voit bien la migration des fragments d'ADN en fonction de la taille (en paires de bases).

Et la deuxième image représente la quantité de fluorescence (donc de fragments d'ADN répliqués) en fonction du nombre de cycle de PCR qui permet de visualiser si la PCR à bien permit l'amplification de l'ADN.

Si tu as besoins de plus de précisions n'hésite pas !